西南大学 网络与继续教育学院
课程代码： 1174 学年学季：20192
单项选择题
1、基因工程菌的稳定性至少要维持在（）以上
. 30 . 25
. 40 .
20
2、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是 （）
. 降低免疫源性
. 延长半衰期 . 降低相对分子量 .
增加组织通透性
3、基因工程菌的高密度发酵过程中，目前普遍采用（ . 葡萄糖
. 甘油 . 甘露醇 .
蔗糖
4、以下可用于菌种纯化的方法有 （ ）
. 诱变处理 . 富集培养 . 高温灭菌 .
平板划线
）作为发 酵 培 养 基的 碳 源
5、第三代抗体是指：（）
. . . .
利用基因工程技术制备的基因工程抗体 融合细胞产生的单克隆抗体
多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋白 B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白
6、获得目的基因最常用的方法是：
. . . .
化学合成法 逆转录法 DNA探针技术 PCR 技术
7、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细
. . . .
人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用
大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化
8、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：（）
. . . .
表达产物为糖基化蛋白质 表达产物为天然产物 容易培养，产物提纯简单
表达产物存在的部位是在菌体内
9、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是（）
. . . .
糖基化 疗效可靠 产量高 性质稳定
10、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是 ：（）
. . . .
BME RMP10 HT HAT
11、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是（）
. . . .
单链抗体 单域抗体 最小识别单位
Fab 片段抗体
12、目前分离的1000多种抗生素，约2/3产自（）
. . . .
病毒 细菌 放线菌 真菌
13、基因表达最常用的宿主菌是：（）
. . . .
大肠杆菌 酵母 链霉菌
枯草芽孢杆菌
14、第三代生物技术（ ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围
. . . .
F. 海洋生物技术 细胞工程技术 基因工程技术 蛋白质工程技术
15、发酵生产中培养基的成分是( )
. . . .
碳源硫源无机盐和水 碳源氮源和水
碳源氮源无机盐微量元素和水 碳源氮源碱土金属元素和水
16、人类第一个基因工程药物是： （）
. . . .
主观题
人胰岛素 重组链激酶
乙型肝炎疫苗 促红细胞生成素
17、细胞因子
参：
由细胞分泌的能调节生物有机体生理功能，参与细胞的增殖、分化和凋亡的小分子多肽物质
18、生物药物
参： 病的制品
19、发酵工程制药
利用生物体、生物组织或其成分，综合应用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学、生
参：
采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的药品，或直接把微生物应
20、胰岛素
参：
是胰脏的内分泌组织。人的胰岛主要是由a，β和γ三种细胞组成。a-细胞分泌胰高血糖素、β
21、基因表达
参：
基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。
22、抗体药物
参：
用于治疗的单克隆抗体、抗体片段、基因工程改造的抗体、免疫偶联物以及融合蛋白均可统称
23、载体
参：
在基因工程重DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
24、亚单位疫苗
参：
不含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白或表面抗原而制成的疫苗。
25、人-鼠嵌合抗体
参：
而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。
26、基因工程药物
嵌合抗体是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的V区基因与人抗体的C区基因拼接
参：
利用DNA重组技术生产出来的药物被称为基因工程药物。
27、疫苗
参：
用于人工主动免疫的生物制品。
28、多肽药物
参：
多肽和蛋白质类药物指用于预防、治疗和诊断的多肽和蛋白质类物质生物药物
29、红细胞生成素
参：
又称促红细胞生成素或红细胞生产刺激因子，是调节红细胞生成的 主要激素。
30、生物技术制药
参： 法进行药物制造的技术。
生物技术制药是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、
31、治疗性酶
参：
传统的药物分子作为受体激动剂或抑制剂也能起到酶治疗的部分效果，但是它们没有催化功能，不
32、核酸药物
参：
具有药理活性的天然结构的核酸类物质和人工合成合成的核酸类物质
33、单克隆抗体
参：
利用杂交瘤技术制备的单克隆抗体及其衍生物，由一个识别一种抗原表位的 B 细胞克隆产生的同
34、按照基因重组蛋白的生产过程将中试工艺分为几个阶段： ， ， ，
参：
细胞培养与发酵、分离纯化、原液配制、分装制剂（冻干）产品
35、发酵工程产品开发的关键是筛选到高效菌株，一般优良菌种的选育方法主要有 、
参：
发酵工程产品开发的关键是筛选到高效菌株，一般优良菌种的选育方法主要有 自然选育 、 诱变
36、核酸药物的一般分类 (1) ；(2) 。
参：
(1)具有天然结构的核酸类物质；(2)天然碱基、核苷、核苷酸的类似物或聚合物
37、常用的细胞破碎方法有物理法和化学法。物理法包括 ， ， ， 。
参：
机械磨碎法、加压破碎法、超声波破碎法、反复冻融法
38、基因工程药物的分离纯化一般不应超过5个步骤，包括 ； ；
参：
基因工程药物的分离纯化一般不应超过5个步骤，包括 细胞破碎 ； 固液分离 ； 浓缩与初步
39、与多数一般有机小分子药物相比，肽类药物具有 、 、 、
参：
活性高、用药剂量小、毒副作用低、代谢终产物为氨基酸
40、细胞因子类药物包括 、 、 、 等。
参：
人干扰素、人白细胞介素、集落刺激因子、促红细胞生成素
41、PCR技术反应周期包括三个步骤： ① ；② ；③ ：
参：
①高温变性；②低温退火；③适温延伸
42、基因工程下游技术则包括含有重组外源基因的生物细胞（基因工程菌或细胞）的 以及外源
参：
大规模培养 分离纯化 产品质量控制
43、基因工程的上游技术指的是 、 。
参：
外源基因重组、克隆后表达的设计与构建
44、常用的细胞破碎方法有物理法和化学法。化学法包括 ， ， ， 等
参：
酶处理法、表面活性剂处理法、脂溶性溶剂处理法、低渗法
45、治疗性酶的临床使用范围:
参： （1）助消化的治疗酶类
消化酶可以用于补充内源消化酶的不足，促进食物中蛋白质、脂肪、糖类的消化吸收，治疗消（2）心血管疾病治疗酶类
心血管疾病治疗酶类是能够作用于血液循环系统的酶，临床上具有独特的抗凝、 止血、扩展（3） 抗肿痛治疗酶类
抗肿瘤的治疗酶类，如L-门冬酰胺酶，是从大肠杆菌发酵液中提取的，是世界上第一个治疗（4）其他治疗酶类
超氧化物歧化酶（SOD)用于治疗类风湿性关节炎和放射病。PEG-腺苷脱氨酶 (PEG-Adenase
疗慢性支气管炎。细胞色素C用于组织缺氧急救，透明质酸酶用于药物扩散剂。青霉素酶可以用
46、根据真核基因在原核细胞中表达的特点，表达载体必须具备那些条件？
参：
表达载体必须具备下列条件：
（1）能够的复制；
（2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记，以利于外源基因的克隆、鉴定和筛选； （3）应具有很强的启动子，能为大肠杆菌的RAN聚合酶所识别； （4）应具有阻遏子 （5）应具有很强的终止子
（6）所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。
47、简述生物技术药物质量控制特点
参：
（1）结构确认的不完全性 等。
（2）质量控制的过程性
生物技术药物多数为蛋白质或多肽及其修饰物，具有分子量相对较大，结构复杂多样性和可变
生物技术药物的结构特性容易受到各种理化因素的影响，且分离提纯工艺复杂，因此其质量控制。生产过程中每一环节或制备条件的改变均可能影响其非临床安全性评价的合理性。
（3）生物活性检测的重要性
生物技术药物的生物活性与其药效和毒性有一定或较好的相关性，因此药效学和安全性研究应
物技术药物天然结构是否遭受破坏、生产各阶段工艺合理性和评价终产品质量控制的重要内容，也
48、列举两种亚单位疫苗
参：
白喉类毒素、破伤风类毒素；流感嗜血杆菌荚膜多糖、脑膜炎球菌荚膜多糖；流感病毒血凝素和神
49、基因工程中的载体应满足什么条件
参：
（1）．能自我复制并能带动插入的外源基因一起复制；（2）．载体分子的合适位置上必须有外源内稳定性高且多拷贝，这样可以保证重组体稳定且高效传代而不易丢失。
制性内切酶位点越多越好，这样可以将不同性内切酶切割后的外源DNA方便的插入载体。（3
50、生物药物的特性
参： 1) 药理学特性 2) 理化特性 剂的特殊要求。
51、简述生物药物的药理学特性
(1) 药理活性高。(2) 治疗的针对性强(3) 毒副作用较少，营养价值高(4)生理副作
(1) 生物材料中的有效物质含量低，杂质种类多且含量相对较髙。(2) 生物活性物质
参：
1、活性强: 体内存在的天然活性物质。 2、治疗针对性强,基于生理生化机制。 3、毒副作用一般
52、简述发酵工程制药的基本过程
参：
1.菌种的选育2. 培养基的配置3 灭菌 4.扩大培养和接种 5.发酵过程 6.分离提纯
53、生物技术药物质量标准的研究内容主要包括
参：
（1）研究生物技术药物产品的均一性。
（2）研究建立生物技术药物产品生物学活性或者免疫学活性测定方法。 （3）研究建立生物技术药物产品的国家标准品或参考品。
（4）建立生物技术药物目标产品生产相关杂质限量分析方法和标准。
（5）在以上研究的基础上制定出保证上述生物技术药物产品安全有效并与WHO标准相一致
54、基因工程制药过程中阳性克隆的筛选方法有哪些
参：
1．根据重组子遗传重组表型改变的筛选法，包括利用抗生素抗性基因进行筛选
通过α互补使菌产生颜色来筛选，利用报告基因筛选克隆子；2．根据重组子结构特征的筛选
法和DNA的序列分析 ；根据表达产物采用免疫化学方法筛选
55、简述基因工程的原理
参：
基因工程作为现代生物技术的关键核心技术，其最终目标是外源目的基因稳定高效表达，要求研究涉及到DNA分子高拷贝复制以及稳定遗传的分子遗传学原理。
1．利用载体DNA在宿主细胞中于染色体DNA而自主复制的特性，将外源基因与载体分子重组
2．筛选、修饰和重组启动子、增强子、操作子、终止子等基因的转录元件，并将这些元件与
3．选择、修饰和重组核糖体位点及密码子等mRNA的翻译元件，强化宿主细胞中蛋白质的生物殖进度的最终数量，是提高外源基因表达目的产物产量的主要环节。
56、简述抗体药物的研发历史
4．基因工程菌（细胞）是现代生物工程中的微型生物反应器，在强化并维持其最佳生产效能的基
参：
第二阶段以1975年Kohler创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。
第一阶段以10年Behring发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来获得多克隆抗体
1986年，美国FDA批准了世界上第一个单抗治疗性药物——抗CD3单抗 OKT3进入市场，第三阶段以1994年Winter以基因工程方法制备人源化抗体为代表
57、简述基因工程药物的质量控制要点
参：
1蛋白质含量的测定。2蛋白质纯度检测。3蛋白质Mr测定。4蛋白质等电点测定。5蛋白质序列
58、简述发酵工程中的菌种选育
参：
菌种选育是按照生产的要求，以微生物遗传变异理论为依据，采用人工方法使菌种发生变异，再用
提高产量，改进质量，降低成本，改进工艺等。选育菌种的基本方法包括自然选育，诱变选育，代
59、简述PCR技术的基本原理
参：
类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退
间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为
降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物环需2～4分钟， 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
60、简述生物药物的用途
制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就
参：
作为治疗药物，作为预防药物，作为诊断药物，其他生物医药用品
61、多肽类药物的功能特性
参：
多肽是生物体内重要的活性成分，主要有以下生理功能和特性： (1) 作为生理活性的调节因子，参与调节各种生理活动和生化反应； (3) 分子小，结构易于改造，可通过化学合成的方法生产；
(2) 多肽具有非常高的生物活性，在极低浓度下依然具有活性，如胆囊收缩素在千万分之一就可
(4) 活性多肽的合成过程往往是由蛋白质经加工剪切转化而来的，因此许多多肽之间具有共同的
62、作为载体的质粒有什么特点？
参：
质粒（plasmid）是染色体外能自主复制并遗传的环状双链DNA分子。质粒的大小不定，一般
细胞中复制，不同质粒在细胞中的复制量不同，于是质粒又有高拷贝的松弛型质粒（relaxed pla
左右，含一个DNA复制起始区或称复制点、二个遗传标记和一些性内切酶切点，一般用于克隆
63、简述单克隆抗体
参：
经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体，是单克隆抗体。单抗的
筛选杂交瘤细胞，筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的克隆化，体外大规模培
、疫苗的发展简史
参：
疫苗发展经过三阶段：以牛痘及脊髓灰质炎疫苗为代表的减毒、灭活疫苗（天花、 小儿麻痹症）
程疫苗为第二代疫苗；表达特定抗原蛋白的核酸疫苗（HIV、HBV、流感病毒、结核病毒等）为第三
65、简述基因工程制药的主要步骤 ； ； ； ；
参：
目的基因的获得 ；构建DNA重组体；构建工程菌 ； 目的基因的表达 ； 产物的分离纯化 ；产品
66、如何控制基因工程药物质量？
参：
基因工程药物的质量控制要点如下。1蛋白质含量的测定。2蛋白质纯度检测。3蛋白质Mr测定。
67、何谓治疗性疫苗。比较治疗性疫苗和预防性疫苗的区别。
参：
治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱导特异性的免疫应答，达
苗与预防性疫苗的主要区别是，一、预防性疫苗主要作用于未感染机体。而治疗性疫苗的作用对象
实验室进行监测，结果可靠，而预防性疫苗可能有一定的不良反应伴有不同程度免疫损伤较为复杂
68、基因工程制药主要步骤
参：
（1）从供体细胞中分离基因组DNA，用性核酸内切酶分别将外源目的DNA和载体分子切开（
（2）用DNA连接酶将含有目的基因的DNA片段接到载体分子上，形成DNA重组分子（简（3）将人工重组的DNA分子导入它们能够正常复制的受体（宿主）细胞中（简称转）；
（4）短时间培养转化细胞，以扩增（amplification）DNA重组分子或使其整合到宿主细胞的
（5）筛选和鉴定转化细胞，获得使外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞（简称检）。
（6）基因工程菌发酵，收获有目的蛋白的发酵液，采用一系列分离纯化手段从发酵液中获得（7）对目的蛋白进行过滤除菌，对某些要求严格的药物而言，还需要除热原等处理。 （8）对目的蛋白进行制剂研究，并进行半成品或成品检测，检测合格后进行包装。
由上述可知，一个完整的基因工程药物的制备包括上游的基因分离、重组、转移、基因在宿主
转、增、检为基因工程药物上游技术的主要操作过程，为了下游获得大量的目的蛋白，必须对上游
69、综合分析生物药物和化学药物的差异，以及这些差异对药物的治疗领域和给药类型的影响
参： 售方式均有不同。
小分子化学药通常是化学合成的，而大分子生物药则通常是生物合成的。源头的不同就直接造成两
与合成的小分子化学药相比，生物药在分子大小上要大一百至上千倍。比如抗体药分子量高达
行车，而生物药的个头则相当于一架飞机，其实两者的区别不仅仅是分子大小的差别。更重要的是
相似还是仿制？
由于生物药具有更大的分子量和复杂的结构，生物药的表征面临很大挑战。但由于上述特点，类药物）的结构和活性也不可避免地会有所变化。
这些特点也注定生物仿制药不可能完全和原研药一模一样，即使是同一家公司生产的同一种生物药
对于生物仿制药生产商而言，由于知识产权保护等多种原因，原研药公司所采用的生产工艺甚小差别都可能会对最终产品的质量、纯度、生物特性以及临床效果产生较大影响。
生物药而言，其生产及流通过程更加复杂，要求也更高，有许多步骤，细胞培养的条件（温度和营
正由于上述种种原因，虽然化学仿制药的英文是generic drug，但是生物仿制药并非是biogen正是由于这个原因，中国有业内人士认为biosimilar应该被译为生物相似药，而非生物仿制药。
而对于传统的小分子化学药而言，一般都有非常确定而且稳定的化学结构，现有的分析方法（
生物药的生产对于其生产条件的要求远比化学药苛刻，当然生产成本也更高，而且生物药的临床前
监管差别
基于此，监管机构（尤其在欧美）要求生物仿制药生产商提供足够的临床数据，这也导致生物
制成本和生产成本，一般生物仿制药和原研药相比，只能降价10%~30%，而化学仿制药则可高达它们会通过中和内源性因子而降低活力甚至诱发严重的副作用。
制药也会很快抢占市场；生物原研药则在专利过期后，其销量受仿制药的影响较小。生物药和化学
上市后的监管同样有区别。化学仿制药由于和原研药结构相同，且结构简单，欧美监管机构允潜在的风险。
而对于生物仿制药，欧盟法规明确要求不允许自动替换。尽管美国目前还没有明确要求，但是目前
所以，相较于化学药，更加复杂并且通常也更加昂贵的生物药推向市场也面临更大的挑战，尤年约占16%）。
70、综合分析生物技术药物质量标准的研究内容
因子等）在总的药物市场所占比例较小，而在欧美获批的创新生物药数量近几年基本占获批新药总
参：
（1）研究生物技术药物产品的均一性。
（2）研究建立生物技术药物产品生物学活性或者免疫学活性测定方法。 （3）研究建立生物技术药物产品的国家标准品或参考品。
（4）建立生物技术药物目标产品生产相关杂质限量分析方法和标准。
（5）在以上研究的基础上制定出保证上述生物技术药物产品安全有效并与WHO标准相一致